ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຂອງການກັ່ນຕອງໃນ cytometry ໄຫຼ.

(Flow cytometry , FCM ) ເປັນຕົວວິເຄາະເຊນທີ່ວັດແທກຄວາມເຂັ້ມຂອງ fluorescence ຂອງເຄື່ອງໝາຍເຊລທີ່ມີຮອຍເປື້ອນ.ມັນເປັນເທກໂນໂລຍີເຕັກໂນໂລຢີສູງທີ່ພັດທະນາໂດຍອີງໃສ່ການວິເຄາະແລະການຈັດລຽງຂອງຈຸລັງດຽວ.ມັນສາມາດວັດແທກແລະຈັດປະເພດຂະຫນາດ, ໂຄງສ້າງພາຍໃນ, DNA, RNA, ທາດໂປຼຕີນ, antigens ແລະຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບຫຼືທາງເຄມີອື່ນໆຂອງຈຸລັງ, ແລະສາມາດອີງໃສ່ການລວບລວມການຈັດປະເພດເຫຼົ່ານີ້.

图片1

Flow cytometer ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນປະກອບດ້ວຍຫ້າພາກສ່ວນດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:

1 ຫ້ອງ​ການ​ໄຫຼ​ແລະ​ລະ​ບົບ fluidics​

2 ແຫຼ່ງແສງເລເຊີແລະລະບົບຮູບຮ່າງ beam

3 ລະບົບ Optical

4 ເອເລັກໂຕຣນິກ, ການເກັບຮັກສາ, ຈໍສະແດງຜົນແລະລະບົບການວິເຄາະ

5 ລະບົບການຈັດຮຽງເຊນ

图片2

ໃນບັນດາພວກເຂົາ, ຄວາມຕື່ນເຕັ້ນເລເຊີໃນແຫຼ່ງແສງເລເຊີແລະລະບົບກອບເປັນຈໍານວນ beam ແມ່ນການວັດແທກຕົ້ນຕໍຂອງສັນຍານ fluorescence ໃນ cytometry ການໄຫຼ.ຄວາມເຂັ້ມຂອງແສງສະຫວ່າງຕື່ນເຕັ້ນແລະເວລາສໍາຜັດແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງກັບຄວາມເຂັ້ມຂອງສັນຍານ fluorescence.ເລເຊີແມ່ນແຫຼ່ງແສງສະຫວ່າງທີ່ສອດຄ່ອງກັນທີ່ສາມາດສະຫນອງຄວາມຍາວຄື່ນດຽວ, ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງ, ແລະຄວາມສະຫວ່າງທີ່ມີຄວາມຫມັ້ນຄົງສູງ.ມັນເປັນແຫຼ່ງແສງສະຫວ່າງທີ່ຫນ້າຕື່ນເຕັ້ນທີ່ເຫມາະສົມສໍາລັບຄວາມຕ້ອງການເຫຼົ່ານີ້.

图片3

ມີສອງເລນຮູບທໍ່ກົມລະຫວ່າງແຫຼ່ງເລເຊີແລະຫ້ອງການໄຫຼ.ເລນເຫຼົ່ານີ້ເນັ້ນແສງເລເຊີທີ່ມີພາກກາງເປັນວົງມົນທີ່ປ່ອຍອອກມາຈາກແຫຼ່ງເລເຊີເຂົ້າໄປໃນ beam elliptical ທີ່ມີສ່ວນຕັດນ້ອຍກວ່າ (22 μm × 66 μm).ພະລັງງານ laser ພາຍໃນ beam elliptical ນີ້ໄດ້ຖືກແຈກຢາຍຕາມການແຜ່ກະຈາຍປົກກະຕິ, ຮັບປະກັນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງແສງສະຫວ່າງທີ່ສອດຄ່ອງສໍາລັບຈຸລັງທີ່ຜ່ານພື້ນທີ່ກວດຫາເລເຊີ.ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, ລະບົບ optical ປະກອບດ້ວຍຫຼາຍຊຸດຂອງເລນ, pinholes, ແລະການກັ່ນຕອງ, ເຊິ່ງສາມາດແບ່ງອອກເປັນສອງກຸ່ມ: ຊັ້ນເທິງແລະລຸ່ມຂອງຫ້ອງນ້ໍາ.

图片4

ລະບົບ optical ຢູ່ທາງຫນ້າຂອງຫ້ອງນ້ໍາປະກອບດ້ວຍທັດສະນະແລະ pinhole.ຫນ້າທີ່ຕົ້ນຕໍຂອງເລນແລະ pinhole (ປົກກະຕິແລ້ວມີສອງເລນແລະ pinhole) ແມ່ນເພື່ອສຸມໃສ່ລໍາແສງເລເຊີທີ່ມີຮູບກົມວົງມົນທີ່ປ່ອຍອອກມາຈາກແຫຼ່ງ laser ເຂົ້າໄປໃນ beam elliptical ທີ່ມີສ່ວນຂ້າມຂະຫນາດນ້ອຍກວ່າ.ນີ້ແຈກຢາຍພະລັງງານເລເຊີຕາມການແຜ່ກະຈາຍປົກກະຕິ, ຮັບປະກັນຄວາມເຂັ້ມຂອງແສງທີ່ສອດຄ່ອງສໍາລັບຈຸລັງໃນທົ່ວພື້ນທີ່ກວດຫາເລເຊີແລະຫຼຸດຜ່ອນການແຊກແຊງຈາກແສງ stray.

 

ມີສາມປະເພດຂອງການກັ່ນຕອງຕົ້ນຕໍ: 

1: Long pass filter (LPF) - ພຽງແຕ່ອະນຸຍາດໃຫ້ແສງສະຫວ່າງທີ່ມີ wavelengths ສູງກວ່າມູນຄ່າສະເພາະທີ່ຈະຜ່ານ.

2: Short-pass filter (SPF) - ພຽງແຕ່ອະນຸຍາດໃຫ້ແສງສະຫວ່າງທີ່ມີຄວາມຍາວຄື່ນຕ່ໍາກວ່າມູນຄ່າສະເພາະທີ່ຈະຜ່ານ.

3: Bandpass filter (BPF) - ພຽງແຕ່ອະນຸຍາດໃຫ້ແສງສະຫວ່າງໃນຂອບເຂດ wavelength ສະເພາະທີ່ຈະຜ່ານ.

ການປະສົມທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງການກັ່ນຕອງສາມາດນໍາສັນຍານ fluorescence ຢູ່ໃນຄວາມຍາວ wavelength ທີ່ແຕກຕ່າງກັນໄປຫາທໍ່ photomultiplier ສ່ວນບຸກຄົນ (PMTs).ຕົວຢ່າງ, ການກັ່ນຕອງສໍາລັບການກວດສອບ fluorescence ສີຂຽວ (FITC) ຢູ່ທາງຫນ້າຂອງ PMT ແມ່ນ LPF550 ແລະ BPF525.ການກັ່ນຕອງທີ່ໃຊ້ເພື່ອກວດຫາ fluorescence ສີສົ້ມ-ສີແດງ (PE) ຢູ່ທາງຫນ້າຂອງ PMT ແມ່ນ LPF600 ແລະ BPF575.ການກັ່ນຕອງສໍາລັບການກວດສອບ fluorescence ສີແດງ (CY5) ຢູ່ທາງຫນ້າຂອງ PMT ແມ່ນ LPF650 ແລະ BPF675.

图片5

Flow cytometry ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນໃຊ້ສໍາລັບການຈັດລຽງເຊນ.ດ້ວຍຄວາມກ້າວຫນ້າຂອງເຕັກໂນໂລຊີຄອມພິວເຕີ, ການພັດທະນາຂອງພູມຕ້ານທານແລະ invention ຂອງເຕັກໂນໂລຊີ monoclonal antibody, ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຂອງຕົນໃນຊີວະສາດ, ຢາປົວພະຍາດ, ຮ້ານຂາຍຢາແລະຂົງເຂດອື່ນໆແມ່ນແຜ່ຫຼາຍ.ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກເຫຼົ່ານີ້ປະກອບມີການວິເຄາະການເຄື່ອນໄຫວຂອງເຊນ, apoptosis ຂອງເຊນ, ການພິມຈຸລັງ, ການວິນິດໄສເນື້ອງອກ, ການວິເຄາະປະສິດທິພາບຂອງຢາ, ແລະອື່ນໆ.


ເວລາປະກາດ: ກັນຍາ-21-2023