(Flow cytometry , FCM ) ເປັນຕົວວິເຄາະເຊນທີ່ວັດແທກຄວາມເຂັ້ມຂອງ fluorescence ຂອງເຄື່ອງໝາຍເຊລທີ່ມີຮອຍເປື້ອນ. ມັນເປັນເທກໂນໂລຍີເຕັກໂນໂລຢີສູງທີ່ພັດທະນາໂດຍອີງໃສ່ການວິເຄາະແລະການຈັດລຽງຂອງຈຸລັງດຽວ. ມັນສາມາດວັດແທກແລະຈັດປະເພດຂະຫນາດ, ໂຄງສ້າງພາຍໃນ, DNA, RNA, ທາດໂປຼຕີນ, antigens ແລະຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບຫຼືທາງເຄມີອື່ນໆຂອງຈຸລັງ, ແລະສາມາດອີງໃສ່ການລວບລວມການຈັດປະເພດເຫຼົ່ານີ້.
Flow cytometer ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນປະກອບດ້ວຍຫ້າພາກສ່ວນດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:
1 ຫ້ອງການໄຫຼແລະລະບົບ fluidics
2 ແຫຼ່ງແສງເລເຊີແລະລະບົບຮູບຮ່າງ beam
3 ລະບົບ Optical
4 ເອເລັກໂຕຣນິກ, ການເກັບຮັກສາ, ຈໍສະແດງຜົນແລະລະບົບການວິເຄາະ
5 ລະບົບການຈັດຮຽງເຊນ
ໃນບັນດາພວກເຂົາ, ຄວາມຕື່ນເຕັ້ນເລເຊີໃນແຫຼ່ງແສງເລເຊີແລະລະບົບກອບເປັນຈໍານວນ beam ແມ່ນການວັດແທກຕົ້ນຕໍຂອງສັນຍານ fluorescence ໃນ cytometry ການໄຫຼ. ຄວາມເຂັ້ມຂອງແສງສະຫວ່າງຕື່ນເຕັ້ນແລະເວລາສໍາຜັດແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງກັບຄວາມເຂັ້ມຂອງສັນຍານ fluorescence. ເລເຊີແມ່ນແຫຼ່ງແສງສະຫວ່າງທີ່ສອດຄ່ອງກັນທີ່ສາມາດສະຫນອງຄວາມຍາວຄື່ນດຽວ, ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງ, ແລະຄວາມສະຫວ່າງທີ່ມີຄວາມຫມັ້ນຄົງສູງ. ມັນເປັນແຫຼ່ງແສງສະຫວ່າງທີ່ຫນ້າຕື່ນເຕັ້ນທີ່ເຫມາະສົມສໍາລັບຄວາມຕ້ອງການເຫຼົ່ານີ້.
ມີສອງເລນຮູບທໍ່ກົມລະຫວ່າງແຫຼ່ງເລເຊີແລະຫ້ອງການໄຫຼ. ເລນເຫຼົ່ານີ້ເນັ້ນແສງເລເຊີທີ່ມີພາກກາງເປັນວົງມົນທີ່ປ່ອຍອອກມາຈາກແຫຼ່ງເລເຊີເຂົ້າໄປໃນ beam elliptical ທີ່ມີສ່ວນຕັດນ້ອຍກວ່າ (22 μm × 66 μm). ພະລັງງານ laser ພາຍໃນ beam elliptical ນີ້ໄດ້ຖືກແຈກຢາຍຕາມການແຜ່ກະຈາຍປົກກະຕິ, ຮັບປະກັນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງແສງສະຫວ່າງທີ່ສອດຄ່ອງສໍາລັບຈຸລັງທີ່ຜ່ານພື້ນທີ່ກວດຫາເລເຊີ. ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, ລະບົບ optical ປະກອບດ້ວຍຫຼາຍຊຸດຂອງເລນ, pinholes, ແລະການກັ່ນຕອງ, ເຊິ່ງສາມາດແບ່ງອອກເປັນສອງກຸ່ມ: ຊັ້ນເທິງແລະລຸ່ມຂອງຫ້ອງນ້ໍາ.
ລະບົບ optical ຢູ່ທາງຫນ້າຂອງຫ້ອງນ້ໍາປະກອບດ້ວຍທັດສະນະແລະ pinhole. ຫນ້າທີ່ຕົ້ນຕໍຂອງເລນແລະ pinhole (ປົກກະຕິແລ້ວມີສອງເລນແລະ pinhole) ແມ່ນເພື່ອສຸມໃສ່ລໍາແສງເລເຊີທີ່ມີຮູບກົມວົງມົນທີ່ປ່ອຍອອກມາຈາກແຫຼ່ງ laser ເຂົ້າໄປໃນ beam elliptical ທີ່ມີສ່ວນຂ້າມຂະຫນາດນ້ອຍກວ່າ. ນີ້ແຈກຢາຍພະລັງງານເລເຊີຕາມການແຜ່ກະຈາຍປົກກະຕິ, ຮັບປະກັນຄວາມເຂັ້ມຂອງແສງທີ່ສອດຄ່ອງສໍາລັບຈຸລັງໃນທົ່ວພື້ນທີ່ກວດຫາເລເຊີແລະຫຼຸດຜ່ອນການແຊກແຊງຈາກແສງ stray.
ມີສາມປະເພດຂອງການກັ່ນຕອງຕົ້ນຕໍ:
1: Long pass filter (LPF) - ພຽງແຕ່ອະນຸຍາດໃຫ້ແສງສະຫວ່າງທີ່ມີ wavelengths ສູງກວ່າມູນຄ່າສະເພາະທີ່ຈະຜ່ານ.
2: Short-pass filter (SPF) - ພຽງແຕ່ອະນຸຍາດໃຫ້ແສງສະຫວ່າງທີ່ມີຄວາມຍາວຄື່ນຕ່ໍາກວ່າມູນຄ່າສະເພາະທີ່ຈະຜ່ານ.
3: Bandpass filter (BPF) - ພຽງແຕ່ອະນຸຍາດໃຫ້ແສງສະຫວ່າງໃນຂອບເຂດ wavelength ສະເພາະທີ່ຈະຜ່ານ.
ການປະສົມທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງການກັ່ນຕອງສາມາດນໍາສັນຍານ fluorescence ຢູ່ໃນຄວາມຍາວ wavelength ທີ່ແຕກຕ່າງກັນໄປຫາທໍ່ photomultiplier ສ່ວນບຸກຄົນ (PMTs). ຕົວຢ່າງ, ການກັ່ນຕອງສໍາລັບການກວດສອບ fluorescence ສີຂຽວ (FITC) ຢູ່ທາງຫນ້າຂອງ PMT ແມ່ນ LPF550 ແລະ BPF525. ການກັ່ນຕອງທີ່ໃຊ້ເພື່ອກວດຫາ fluorescence ສີສົ້ມ-ສີແດງ (PE) ຢູ່ທາງຫນ້າຂອງ PMT ແມ່ນ LPF600 ແລະ BPF575. ການກັ່ນຕອງສໍາລັບການກວດສອບ fluorescence ສີແດງ (CY5) ຢູ່ທາງຫນ້າຂອງ PMT ແມ່ນ LPF650 ແລະ BPF675.
Flow cytometry ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນໃຊ້ສໍາລັບການຈັດລຽງເຊນ. ດ້ວຍຄວາມກ້າວຫນ້າຂອງເຕັກໂນໂລຊີຄອມພິວເຕີ, ການພັດທະນາຂອງພູມຕ້ານທານແລະ invention ຂອງເຕັກໂນໂລຊີ monoclonal antibody, ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຂອງຕົນໃນຊີວະສາດ, ຢາປົວພະຍາດ, ຮ້ານຂາຍຢາແລະຂົງເຂດອື່ນໆແມ່ນແຜ່ຫຼາຍ. ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກເຫຼົ່ານີ້ປະກອບມີການວິເຄາະການເຄື່ອນໄຫວຂອງເຊນ, apoptosis ຂອງເຊນ, ການພິມຈຸລັງ, ການວິນິດໄສເນື້ອງອກ, ການວິເຄາະປະສິດທິພາບຂອງຢາ, ແລະອື່ນໆ.
ເວລາປະກາດ: ກັນຍາ-21-2023
